هالنډي څیړونکي د CRISPR او بایولومینیسینس لپاره په تجربوي ازموینه کې ترکیب کويساري ناروغۍ

په هالنډ کې د څیړونکو په وینا یو نوی رامینځته شوی د شپې پروټین کولی شي د ویروس ناروغیو تشخیص ګړندی او ساده کړي.
د دوی څیړنه چې د چهارشنبه په ACS خپرونو کې خپره شوې، د روښانه روښانه نیلي یا شنه پروټینونو په کارولو سره د ویروس نیوکلیک اسیدونو او د دوی ظاهري ګړندي تحلیل لپاره حساس ، یو ګام میتود تشریح کوي.
د نیوکلیک اسید ګوتو نښو په کشفولو سره د ناروغیو پیژندل د کلینیکي تشخیص ، بایو میډیکل څیړنې ، او د خواړو او چاپیریال خوندیتوب نظارت کې کلیدي ستراتیژي ده.په پراخه کچه کارول شوي کمیتي پولیمیریز چین عکس العمل (PCR) ازموینې خورا حساس دي ، مګر د نمونو پیچلي چمتووالي یا د پایلو تشریح ته اړتیا لري ، دا د ځینې روغتیا پاملرنې ترتیباتو یا سرچینو محدود ترتیباتو لپاره غیر عملي کوي.
د هالنډ څخه دا ډله د پوهنتونونو او روغتونونو د ساینس پوهانو ترمنځ د همکارۍ پایله ده ترڅو د ګړندۍ، پورټ ایبل او اسانه کارونې نیوکلیک اسید تشخیص میتود رامینځته کړي چې په مختلف ترتیباتو کې پلي کیدی شي.
دوی د اور وژونکي څراغونو، د اور د مچیو چمکونو، او د آبی فایټوپلانکټون کوچني ستورو څخه الهام اخیستي، چې ټول یې د بایولومینیسینس په نوم د یوې پیښې لخوا ځواکمن شوي.دا په تیاره کې روښانه اغیزه د کیمیاوي تعامل له امله رامینځته کیږي چې د لوسیفیریز پروټین پکې شامل دي.ساینس پوهانو په سینسرونو کې لوسیفریز پروټینونه شامل کړي چې د لیدو اسانتیا لپاره رڼا خپروي کله چې دوی هدف ومومي.پداسې حال کې چې دا دا سینسرونه د پاملرنې موندلو لپاره مثالی کوي، دوی اوس مهال د کلینیکي تشخیصي ازموینو لپاره اړین لوړ حساسیت نلري.پداسې حال کې چې د CRISPR جین ترمیم طریقه کولی شي دا وړتیا چمتو کړي، دا ډیری ګامونو او اضافي ځانګړو تجهیزاتو ته اړتیا لري ترڅو ضعیف سیګنال کشف کړي چې په پیچلي، شور نمونو کې شتون لري.
څیړونکو یوه لاره موندلې چې د CRISPR پورې اړوند پروټین د بایولومینیسینټ سیګنال سره یوځای کړي چې د ساده ډیجیټل کیمرې سره کشف کیدی شي.د دې لپاره چې ډاډ ترلاسه شي چې د تحلیل لپاره کافي RNA یا DNA نمونه شتون لري، څیړونکو د recombinase polymerase amplification (RPA) ترسره کړی، یو ساده تخنیک چې د 100 ° F په دوامداره تودوخې کې فعالیت کوي.دوی یو نوی پلیټ فارم رامینځته کړ چې د Luminescent Nucleic Acid Sensor (LUNAS) په نوم یادیږي، په کوم کې چې دوه CRISPR/Cas9 پروټینونه د ویروس جینوم مختلف پرتو برخو لپاره ځانګړي دي، هر یو یې د یو ځانګړي لوسیفریز ټوټې سره چې پورته یې ورسره وصل دی.
کله چې یو ځانګړی ویروس جینوم چې څیړونکي یې معاینه کوي شتون لري، دوه CRISPR/Cas9 پروټینونه د هدف نیوکلیک اسید ترتیب سره تړلي دي؛دوی په نږدې کې واقع کیږي، د کیمیاوي سبسټریټ په شتون کې د ثابت لوسیفریز پروټین رامینځته کولو او نیلي رڼا ته اجازه ورکوي..پدې پروسه کې مصرف شوي سبسټریټ حساب کولو لپاره ، څیړونکو د کنټرول عکس العمل کارولی چې شنه ر lightا خپروي.یو ټیوب چې رنګ له شنه څخه نیلي ته بدلوي مثبت پایله په ګوته کوي.
څیړونکو خپل پلیټ فارم د RPA-LUNAS ارزونې په رامینځته کولو سره ازمولی ، کوم چې کشف کويSARS-CoV-2 RNAپرته له ستړیا RNA جلا کول، او خپل تشخیصي فعالیت یې د nasopharyngeal swab نمونو په اړه ښودلی.COVID 19ناروغانRPA-LUNAS په بریالیتوب سره SARS-CoV-2 په 20 دقیقو کې په نمونو کې د RNA ویروس بار سره د 200 کاپي / μL ټیټ سره کشف کړ.
څیړونکي پدې باور دي چې د دوی ارزونه کولی شي په اسانۍ او مؤثره توګه ډیری نور ویروسونه کشف کړي."RPA-LUNAS د پاملرنې د ساري ناروغۍ ازموینې لپاره زړه راښکونکي دي ،" دوی لیکلي.